CIK细胞免疫治疗介绍
什么是细胞过继免疫治疗？
将自体或异体的免疫活性细胞经过体外扩增后输入患者体内，直接杀伤肿瘤细胞，调节和增强机体的免疫功能，称为细胞过继免疫治疗。
常见的几种细胞过继免疫治疗包括
LAK细胞－淋巴因子诱导的杀伤细胞、
TIL细胞－肿瘤浸润淋巴细胞和CIK细胞。
什么是CIK细胞？
CIK细胞的英文全称是cytokine-induced killer ，即细胞因子诱导的杀伤细胞。
CIK细胞是一种异质细胞群，进行免疫表型分析发现CD3＋细胞、CD8＋细胞较多，尤其是CD3＋ CD56＋细胞。因此CIK细胞同时具有T细胞和NK细胞的标志。
实验证明，CIK细胞起源于CD3＋T细胞而非CD56＋NK细胞。
CIK细胞是如何制备的？
CIK细胞是在多种细胞因子即IL-2、IL-1、IFN-r、抗CD3单克隆抗体等存在的条件下，从外周血、骨髓或脐血中分离出单个核细胞，经过一定时间培养而获得的一种免疫活性细胞。这些细胞因子的给予有一定的时间顺序。
正常情况下，机体内含有少量CD3+ CD56+ 细胞。但在上述培养条件下， CD3+ CD56+细胞可大量扩增，扩增倍数可达几十倍甚至上百倍，在培养2～3周时效应细胞数目将达到最高。
CIK细胞的高增殖活性解决了体外扩增效应细胞所获细胞数目少的难题。
CIK细胞免疫抗肿瘤的可能机制
同NK、LAK细胞一样，通过淋巴细胞功能相关抗原-1与靶细胞表面的细胞间粘附分子-1相互识别、结合而发挥作用。
CIK细胞胞质中含有大量颗粒，颗粒中含有BLT、酯酶、穿孔素、细胞溶解素等，使靶细胞发生渗透性溶解或直接杀死胞内致病菌。
CIK细胞分泌多种细胞因子进一步提高免疫效应细胞的细胞毒作用，同时可以上调CD2、CD18等粘附分子的表达，增加效应细胞的免疫作用。
CIK细胞的特点是什么？
增殖速度快
杀瘤活性高
杀瘤谱广
对多重耐药肿瘤细胞同样敏感
杀瘤活性不受CSA、FK506等免疫抑制剂的影响
对正常骨髓造血前体细胞毒性很小
能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas—FasL凋亡
特点——增殖速度快
CIK细胞在培养过程中加入IFN-r 、IL-la、抗CD McAb、IL-2等因子后, 细胞增殖速度迅速加快，远超过LAK细胞 。在培养第22天增殖曲线达顶峰，约增加100倍，其中CD3＋CD56＋细胞不仅绝对数量增加 1000倍以上．且所占百分比也大幅上升，至培养28-30天时达平台期，细胞毒活性亦达峰值，而LAK细胞培养前后数量没有明显增加
特点——杀瘤活性高
CIK细胞是以CD3＋CD56＋ T细胞为主的异质细胞群，大量体内外实验证实CIK细胞较以NK细胞为主的LAK细胞具备更强大的杀瘤活性，而且其体内杀瘤细胞毒性的维持不必依赖大剂量外源性IL-2的持续给予。
体外实验中，任欢 和Lu 等均发现在体外等数量的CIK细胞比LAK细胞对肿瘤细胞系的杀伤能力稍高或相近，但因CIK细胞在培养过程中CD 3＋CD56+效应细胞增长迅速，故CIK细胞的总杀伤单位(TLI5)为LAK细胞的73倍甚至更高，其杀伤效率显著高于LAK细胞
特点——杀瘤谱广
CIK细胞虽然以CD 3＋CD56+细胞为主要效应细胞，但却没有T淋巴细胞杀伤时的MHC限制性，故对于多种肿瘤细胞系，包括NK敏感的K562和NK不敏感的Hela、HL60、人T细胞急淋白血病细胞系CCRF-CEM， 人淋巴瘤细胞系OCI-LY8/TAM53，人结肠癌细胞系HT-29、CR75、人肾癌细胞系A704 和新鲜肿瘤组织均表现出强大的杀伤活性。
特点——对多重耐药肿瘤细胞同样敏感
WOLF用阿霉素和长春新碱诱导多重耐药细胞系K562／DOX和CCRF-CEM-VBI ，发现CIK细胞对化疗药物敏感的亲本细胞和不敏感的转化细胞均具有强大的杀伤活性，两者比较无差别。
特点——杀瘤活性不受CsA、FK506等免疫抑制剂的影响
Mehtat f观察到免疫抑制剂CsA和FK506虽然可以抑制抗CD3＋单抗介导的CIK细胞脱颗粒过程，却不影响靶细胞诱导的CIK细胞脱颗粒，并且CIK细胞对靶细胞的杀伤活性不会因此降低。
特点——对正常骨髓造血前体细胞毒性很小
Scheffold 通过CFU-GM形成实验检测CIK细胞对骨髓造血前体细胞的影响，发现CIK细胞对K562细胞的杀伤强度高达3级，但对GM-CFU仅有不足1级的抑制。HoIye也证实CIK细胞对正常髓系克隆生成几乎没有影响，只是对红系的生成显示出轻度抑制。
特点——能抵抗肿瘤细胞引发的效应细胞Fas-Fasl凋亡
已证明过继免疫治疗失败的一个重要原因是过继效应细胞被肿瘤细胞表面表达的某些蛋白(主要是Fasl)诱导凋亡，而CIK细胞虽然在Fas被占据后会引起少量细胞凋亡，但对其杀瘤细胞毒性没有明显影响 。
Vernerist的实验提示CIK细胞内有抗凋亡基因表达，并检出多种保护基因，如eFLIPBcl-2、Bcl-XI、DADI和survivin的转录水平上调，同时发现CIK细胞具备合成FasL的能力，表明CIK细胞可以对抗体内FasL阳性肿瘤。
CIK细胞和其他几种细胞相比，优势在哪里？
TIL细胞虽然有很强的杀瘤活性，但要获取大量的TIL细胞十分困难 ，且离体TIL易发生活性改变；
LAK细胞的获取也较困难，体内应用还需外源性的IL-2支持，毒副反应大，杀瘤活性也较TIL等T淋巴细胞为低。
CIK细胞增殖速度快，比LAK细胞具有更强的杀瘤活性，杀瘤谱广，对多重耐药肿瘤细胞敏感，对正常骨髓造血毒性小，回输体内后可持续分裂增生。
CIK细胞的适应症有哪些？
应用LAK细胞是目前较为普及的肿瘤过继免疫治疗方案，广泛使用于黑色素瘤、肾细胞癌、非霍奇金淋巴瘤、肺癌和结肠癌。
CIK细胞凭借增殖速度快、杀瘤活性高的优势有望取代LAK细胞成为新一代肿瘤过继细胞免疫治疗的主力军。
CIK细胞的适应症有哪些？
一、放化疗诱导缓解后的肿瘤患者，
CIK细胞可以在不损伤机体免疫系统结构和功能的前提下，直接杀伤肿瘤细胞，调节和增强机体的免疫功能，因而成为肿瘤手术、放疗、化疗的重要辅助手段，为预防肿瘤复发，改善晚期患者的生存质量提供了新途径。一般在放疗、化疗后间隔2～4周，机体免疫力有所恢复时，输入CIK细胞，可提高肿瘤患者的缓解率 。在清除微小残留病灶方面，CIK细胞也发挥着重要作用。
CIK细胞的适应症有哪些？
二、对多药耐药肿瘤细胞的影响
肿瘤细胞对药物的耐受性是许多恶性肿瘤治疗的主要障碍。人们正致力于如何逆转多药耐药及逆转耐药药物的研究。Schmidt Wolf等 研究证实对柔红霉素耐药的K562细胞对CIK细胞较敏感，表明CIK细胞对恶性克隆形成的抑制作用与多药耐药基因的表达无关，这一发现对克服化学治疗诱导的药物耐药提供了一个有效的治疗前景。
CIK细胞的适应症有哪些？
三、晚期肿瘤病人
传统的手术，放、化疗无法耐受，应用CIK细胞治疗可以改善生活质量，延长生存期。
四、骨髓移植后免疫治疗
骨髓移植可以使白血病患者得到根治，但无论是异体移植或自体骨髓移植，都存在一定的复发率。CIK细胞从白血病患者体内取出培养后，在体内外有很强的杀伤K562细胞、裂解急性髓系白血病细胞的作用，可提高自体移植后免疫治疗作用，降低复发率。
哪些情况不适合用CIK细胞治疗？
禁忌症：
一、CIK细胞对化疗药物敏感，不能与化疗同时应用。
二、IL-2过敏患者，不能用CIK细胞治疗。
CIK细胞今后的研究方向
在CIK细胞的培养体系中，加入植物血凝素可刺激T细胞增殖；对曾感染或接种过结核杆菌的患者，加入卡介苗，可提高T细胞的增殖活性 ；用重组的MVC-1病毒疫苗刺激淋巴细胞获得无人HLA限制性的杀伤性T淋巴细胞，用于过继免疫治疗，使体内CD3 CD56 CD8 细胞明显增多
在CIK细胞上转染含有IL-2、IL-7或IL-12的基因 ，使CIK细胞在体内不断增殖；同时含有转染细胞因子基因的CIK细胞可使血清中某些细胞因子水平增高，而提高效应细胞的细胞毒作用
CIK细胞今后的研究方向
双特异抗体即CD3＋ 单克隆抗体与抗靶细胞表面特异抗原的抗体结合物的应用，使效靶细胞的结合更直接，到达靶细胞的效应细胞数目增多，从而增强其效应
树突状细胞(dendritic cell，DC)是机体内功能最强的抗原提呈细胞，将DC和CIK细胞进行混合培养，将使培养物的杀伤活性明显增加
一例CIK细胞治疗有效病例介绍
患者，女性，50岁，2002年5月因左腰酸胀不适，查B超，X-CT发现左肾囊性占位， 2005年5月18日行左肾切除术，病理左肾囊性肾细胞癌，术后IL-2，INF免疫治疗，未行化/放疗，2005年4月出现左腰痛，6月查X-CT示左肾上腺区，腰大肌等周围软组织及后腹膜淋巴结转移，肺内多发转移，纵隔淋巴结肿大，予GEM单药化疗5疗程，
一例CIK细胞治疗有效病例介绍
用药为GEM1.4 day1.8.15，2005年10月X-CT示肿块无明显缩小，部分肋骨溶骨性转移，入住我科后，于11月23日行左肾动脉栓塞术，11月28日和12月30日CIK细胞治疗2次，12月20日IL-2，INF免疫治疗一疗程，患者肺部病灶明显好转。
